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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章bulldog-bio ECFG21說明書

bulldog-bio ECFG21說明書

更新時間:2019-07-04點(diǎn)擊次數(shù):2202

Bulldog Bio Inc.是一家混合型組織,結(jié)合了銷售子公司和服務(wù)分銷商的適合品質(zhì)。我們*的營銷,銷售和支持產(chǎn)品線的方法使我們成為年輕公司在復(fù)雜和競爭激烈的美國市場中建立業(yè)務(wù)的理想合作伙伴。無論產(chǎn)品線的技術(shù)復(fù)雜程度如何,我們都專注于建立長期可持續(xù)發(fā)展的業(yè)務(wù)。

bulldog-bio ECFG21說明書

 

ECFG21 Super Electro- Cell Fusion System

ECFG21超級電池融合系統(tǒng)

效率顯著高于PEG

 

我們的新設(shè)備提供通電結(jié)果
試管中體細(xì)胞的自發(fā)融合發(fā)生不到1,000,000次中的1次。雖然如果你是一個有生命的有機(jī)體,這是好的,但有時需要將細(xì)胞融合用于特殊應(yīng)用。從歷*看,PEG等化學(xué)物質(zhì)已被用于增加自發(fā)融合2或3個數(shù)量級; 或者,已經(jīng)使用滅活病毒促進(jìn)近端細(xì)胞融合至同等水平。近,利用AC和DC電場的方案進(jìn)一步提高了細(xì)胞融合的效率 - 在某些情況下,多達(dá)25至100倍。

ECFG21采用的固態(tài)電子設(shè)計,可提供強(qiáng)大的系統(tǒng),并提供大量有用的反饋。兩相技術(shù)依賴于AC場以在鏈形成中端對端地物理對齊細(xì)胞。一旦進(jìn)入它們的物理接觸,系統(tǒng)就會施加一系列DC脈沖來破壞質(zhì)膜并誘導(dǎo)相鄰細(xì)胞的融合。在接下來的30分鐘內(nèi),每百個細(xì)胞中就有一個產(chǎn)生具有兩個細(xì)胞核的活細(xì)胞。原子核隨后融合,過程完成。只有ECFG21才能提供電壓和電流的實(shí)時反饋,以確保每個樣品都處于的細(xì)胞融合條件下。ECFG21控制AC到DC的切換時間,DC脈沖幅度和長度(包括方便的反極性選項),后融合AC電流用于維持端到端電池配置。它甚至可以手動控制直流脈沖 - 在顯微鏡下觀察細(xì)胞優(yōu)化時非常有用。

對這個新系統(tǒng)的評論是巨大的。據(jù)報道,與化學(xué)和病毒方法相比,ECFG21可以更好地控制實(shí)驗條件。這是由于電場反饋; 系統(tǒng)可以實(shí)時確定離子條件是否不是融合的條件,因為高離子濃度會產(chǎn)生溶液的物理流和細(xì)胞鏈的破壞。電 - 細(xì)胞融合通常產(chǎn)生更穩(wěn)定的雜交細(xì)胞系,部分原因在于電場固有的較低細(xì)胞毒性和該儀器的脈沖控制。結(jié)果往往更具可重復(fù)性和可重復(fù)性。不要忘記人的因素!在Bulldog,我們將與您密切合作,以優(yōu)化您的結(jié)果,我們有多年的經(jīng)驗。

 

新的研究前景
體細(xì)胞融合是一個棘手的過程,傳統(tǒng)上用于制備單克隆抗體的雜交瘤。這種經(jīng)典技術(shù)將永生性骨髓瘤細(xì)胞系與產(chǎn)生脾的抗體產(chǎn)生B細(xì)胞融合。該雜交瘤細(xì)胞系將穩(wěn)定地產(chǎn)生數(shù)月或數(shù)年的特異性單克隆抗體。細(xì)胞融合也被用于詢問有關(guān)基因表達(dá)和研究癌癥進(jìn)展的基本問題。例如,已經(jīng)將ES / EG細(xì)胞與T細(xì)胞融合以通過重編程多能干細(xì)胞來研究T細(xì)胞活化。該申請還能夠在非宿主細(xì)胞中擴(kuò)增病毒顆粒,或者可以用于研究細(xì)胞如何分裂,并且已經(jīng)被用于融合卵母細(xì)胞和體細(xì)胞的巨大成功。還有許多其他鮮為人知的應(yīng)用,如融合酵母和霉菌細(xì)胞,

Hybridomas表達(dá)了對ECFG21的熱愛
,我們的客戶之一是Precision Antibody,多年來一直致力于開發(fā)基于經(jīng)典PEG方法的高度優(yōu)化的細(xì)胞融合方案。他們的程序?qū)е聻樗麄兊目蛻羯a(chǎn)的抗體。當(dāng)他們要求我們使用ECFG21來解決他們困難的抗原時,我們持謹(jǐn)慎樂觀的態(tài)度。事實(shí)上,當(dāng)終結(jié)果統(tǒng)計出來時,每個人都被電融合技術(shù)提供的巨大改進(jìn)所震撼。他們測試了三種不同類別的抗原,以及ECFG21改善其中產(chǎn)生的雜交瘤數(shù)量的能力。此外,他們計算了其中有多少實(shí)際上與抗原的反應(yīng)性呈陽性。種是相當(dāng)大的20kDa免疫抑制蛋白,用PEG制備雜交瘤,結(jié)果很好,但是甚至不能產(chǎn)生與抗原反應(yīng)的單個陽性克隆。測試的第二和第三抗原都是短的(分別為8和17個氨基酸)和疏水的。他們再次產(chǎn)生了少量的雜交瘤,但是當(dāng)使用PEG方法時,很少有陽性反應(yīng)性克隆。使用ECFG21得到的雜交瘤數(shù)量為高出25倍至100倍。更令人印象深刻的是,與抗原呈陽性的雜交瘤克隆數(shù)量(這是重要的考慮因素),高出驚人的50倍至200倍以上。如果您的實(shí)驗室希望始終如一地生產(chǎn)特異性單克隆抗體,那么ECFG21不僅僅是好的 - 它是您明智的選擇。

體細(xì)胞核移植(SCNT)
ECFG21能夠使用去核卵母細(xì)胞對體細(xì)胞進(jìn)行動物克隆再分泌。

 

四倍體胚胎互補(bǔ)
參見用于四倍體嵌合體生產(chǎn)的ECFG21,使用兩步克隆程序從癌細(xì)胞產(chǎn)生小鼠。

附加信息

使用ECFG21的細(xì)胞融合效率比PEG高25-100倍

這三種抗原都被歸類為“難以獲得陽性克隆”。ECFG21在所有情況下都大大增加了克隆數(shù)量,并且至少在一個案例中,當(dāng)傳統(tǒng)PEG方法沒有產(chǎn)生克隆時,導(dǎo)致陽性克隆。

1)使用的抗原:20kDa免疫抑制蛋白,具有高度同源性

2)使用的抗原:疏水性八肽

3)使用的抗原:高度疏水的17個氨基酸肽。

融合/ M:每1×10 6個  淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的雜交瘤數(shù)
陽性克隆/ M:每1×10 6個  淋巴細(xì)胞產(chǎn)生針對抗原的單克隆抗體的克隆數(shù)
E w / P2:使用CUY497P2電極進(jìn)行ECFG21電融合(高0.8 mL)
E w / P8X10:使用CUY497P8X10電極進(jìn)行ECFG21電融合(高6.4 mL)

數(shù)據(jù)由精密抗體副總裁Jun Hayashi博士提供 

 

AC

電壓0 - 80 Vrms
頻率1 MHz
持續(xù)時間0-99秒
融合后期限0-99秒
后融合衰變模式開關(guān)
在AC / DC之間暫停5微秒

直流脈沖

脈沖波方波
電壓1 - 1500 V
脈沖長度1-99微秒
脈沖間隔0.1 - 9.9秒
脈沖數(shù)0 - 99
衰減率0 - 99%
極性切換開關(guān)

輸出測量

電壓AC / DC
當(dāng)前AC / DC
能量(J)DC

其他

阻抗測量0.01 - 50kΩ
操作模式自動/手動
記憶99個節(jié)目
電源要求AC100-240V 50 / 60Hz
尺寸386(W)×370(D)×121(H)mm
重量9公斤
保證2年

 

 

 

 

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