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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章haemtech HCXIA-0160說明書

haemtech HCXIA-0160說明書

更新時(shí)間:2019-10-14點(diǎn)擊次數(shù):2160

Haematologic Technologies,Inc.(HTI)是一家通過ISO 9001:2015注冊的公司,是一家主要從事旨在用于體外研究的高質(zhì)量血漿蛋白的分離和表征的主要生產(chǎn)商。HTI的重點(diǎn)是參與凝血級聯(lián)反應(yīng)的蛋白質(zhì),以及骨骼代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括150多種高度純化且特性良好的蛋白質(zhì),包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)產(chǎn)品系列。還提供因子不足的血漿和定制的用于臨床研究的定制采血管。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,蛋白質(zhì)修飾,分析開發(fā),合同制造和合同研究。

Haematologic Technologies,Inc.的使命是為凝血研究界提供高質(zhì)量的蛋白質(zhì)和試劑。我們努力在制造和質(zhì)量控制過程中不斷取得進(jìn)步,以確保我們的產(chǎn)品優(yōu)于競爭對手的產(chǎn)品。HTI還努力通過內(nèi)部努力,并在血栓形成和止血研究的頂部與公司建立戰(zhàn)略關(guān)系,從而致力于凝血研究的前沿。

haemtech HCXIA-0160說明書

Human Coagulation Factor XIa

人凝血因子XIa

因子XI
的蛋白水解激活說明了因子XIIa激活因子XI。盡管因子XI可以獨(dú)立地結(jié)合到帶負(fù)電荷的表面,但是因子XIIa的蛋白水解只能在存在表面結(jié)合的高分子量激肽原(HMWKa)的情況下發(fā)生。結(jié)合的HMWKa對新產(chǎn)生的因子XIa易于蛋白水解,導(dǎo)致其生物學(xué)活性(HMWKi)降低。XIA因子在溶液相或與帶負(fù)電荷的表面結(jié)合時(shí)催化IX到IXa的蛋白水解轉(zhuǎn)化。

 HCXIA-0160 人為因素XIa

 

尺寸50微克
公式50%甘油/水(v / v)
存儲-20°攝氏度
純度通過SDS-PAGE,> 95%
活性測定因子XI凝血測定
保質(zhì)期(正確存放)12個月

 

 

 

 

 

 

在高分子量激肽原(HMWK)存在下,XIIa因子對XI進(jìn)行蛋白水解,產(chǎn)生了XIa酶因子(1-3)。因子XIa是一種絲氨酸蛋白酶,其通過催化因子IX向因子IXa的轉(zhuǎn)化而參與內(nèi)在的凝血途徑。由于因子XI是同型二聚體,因此酶XIa由兩條相同的重鏈(Mr = 50,000)和兩條相同的輕鏈(Mr = 30,000)組成,它們均通過二硫鍵結(jié)合在一起。后一種特性使因子XIa在絲氨酸蛋白酶中獨(dú)樹一幟,因?yàn)槊總€分子包含兩個活性位點(diǎn)(1-3)。

XIa因子與其前體XI因子一樣,仍與HMWK形成復(fù)合體(4)。以復(fù)雜形式,因子XIa / HMWK能夠?qū)⒁蜃覺II激活為因子XIIa,將前激肽釋放酶激活為激肽釋放酶。另外,以復(fù)合形式,因子XIa受蛋白酶抑制劑的影響較?。?)。XIa因子的主要血漿抑制劑是α1-抗胰蛋白酶,其次是抗凝血酶-III(5,6)。當(dāng)以復(fù)合物形式存在時(shí),因子XIa可以催化HMWK的蛋白水解,產(chǎn)生生物學(xué)上無活性的HMWK(HMWKi)形式,從而使因子XIa / HMWKi復(fù)合物解離。游離因子XIa或因子XIa / HMWK復(fù)合物催化IX到IXa的蛋白水解轉(zhuǎn)化。

通過用因子XIIa活化純化的因子XI來制備因子XIa?;罨?,將混合物通過固定化抗因子XII的柱以去除因子XIIa,并在肝素-瓊脂糖上進(jìn)一步純化。XIa因子以50%(體積/體積)甘油/ H2O的形式提供,應(yīng)儲存在-20°C下。通過SDS PAGE分析評估純度。使用凝血因子XI缺陷血漿在凝血測定中確定活性。

 

凝膠Novex 4-12%Bis-Tris
加載人血因子XIa,每泳道1 µg
緩沖拖把
標(biāo)準(zhǔn)參見BluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa)

 

 

 

本土化等離子體; 與高分子量激肽原結(jié)合
行動方式將因子IX轉(zhuǎn)換為IXa的絲氨酸蛋白酶
分子量160,000(1,2)
消光系數(shù)
Ë
1%
1厘米,280海里
= 13.4(人類)(2)-(從酶原推斷出因子XI)
結(jié)構(gòu)體通過二硫鍵將兩個看似相同的重鏈(Mr?50,000)和兩個看似相同的輕鏈(Mr?30,000)連接在一起。每條輕鏈包含一個催化結(jié)構(gòu)域(1,3)。
碳水化合物百分比5%(人類)(1)

 

參考文獻(xiàn)

  1. Kurachi,K。和Davie,EW,生物化學(xué),16,5831(1977)。
  2. BoN,BN和Griffen,JH,J.Biol。Chem。,252,6432(1977)。
  3. Kurachi,K。等人,Biochemistry,19,1330(1980)。
  4. 湯普森,RE,等人,臨床雜志。Invest。,60,1376(1977)。
  5. 斯科特,CF,等人,臨床雜志。Invest。,69,844(1982)。
  6. Heck,LW和Kaplan,AP,J。Exp.。Med.140,1615(1974)。

樣本出版物:

  1. Choudhri,T.等,J Exp Med。1999年7月1日;190(1):91-100。(因子IX的激活)

 

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