NTRC是一家總部位于荷蘭Oss的私人生物技術(shù)公司，由MSD / Organon的前雇員成立。NTRC將有關(guān)疾病治療的新穎生物學(xué)概念轉(zhuǎn)化為小分子候選藥物。NTRC擁有強大的學(xué)術(shù)網(wǎng)絡(luò)，可利用它來確定小分子藥物發(fā)現(xiàn)的新方法和創(chuàng)新方法。NTRC開發(fā)了許多突破性的技術(shù)平臺。這些平臺可作為NTRC Precision Medicine Services供客戶使用。

NTRC精氨酸金分析

Arginase Gold™檢測技術(shù)基于使用專有探針Arginase Gold™檢測Arginase-1活性。探針在精氨酸存在下發(fā)出熒光信號，在鳥氨酸存在下淬滅（圖1）。Arginase Gold™是一種均勻的混合測量（“僅添加”）測定。通過在室溫下的單個溫育步驟檢測精氨酸。該測定法利用了熒光讀數(shù)，并且功能強大（Z'因子> 0.6）?？梢詫崟r跟蹤測定的進展，從而進行動力學(xué)實驗。Arginase Gold™是專門為用于多孔板和高通量篩選而開發(fā)的。

圖1.精氨酸金™分析的示意圖。使L-精氨酸向L-鳥氨酸的酶促轉(zhuǎn)化進行60分鐘，此后可以立即用510nm的熒光檢測來測量反應(yīng)的進程。

精氨酸酶1

精氨酸酶-1是將L-精氨酸轉(zhuǎn)化為L-鳥氨酸的酶。精氨酸酶-1是癌癥免疫療法的重要藥物靶標(biāo)。從大腸桿菌重組表達并純化全長精氨酸酶-1。純化的精氨酸酶-1將L-精氨酸催化轉(zhuǎn)化為L-鳥氨酸。

•在高達2.5 mM的濃度范圍內(nèi)，Arginase Gold™的信號與L-精氨酸和L-鳥氨酸的比例成線性比例（圖2）。
•Arginase Gold™非常適合化合物庫的高通量篩選。

圖2.測定中L-精氨酸和L-鳥氨酸濃度的Arginase Gold™校準(zhǔn)曲線。B.測定法產(chǎn)生的精氨酸酶-1參考抑制劑ABH的劑量反應(yīng)曲線。

好處

•酶活性以均一的測定形式測量。讀出前僅需要兩個附加步驟。
•在室溫下溫育時間短，反應(yīng)條件溫和，可在384孔板的高通量機器人系統(tǒng)上操作。
•適用于高通量篩選的穩(wěn)健分析。
•精氨酸酶1的抑制導(dǎo)致信號的獲得。
•可以使用同一套件進行動力學(xué)實驗和終點測量。
•與標(biāo)準(zhǔn)比色尿素測定法相比，熒光讀數(shù)不易受到干擾。
•該測定可在短時間內(nèi)進行，從反應(yīng)開始到熒光檢測僅需1.5個小時。

可直接從NTRC訂購1,000個數(shù)據(jù)點的Arginase Gold™試劑盒，以備使用。產(chǎn)品編號為NTRC-hARG-1K。該試劑盒包括Arginase-1酶，底物，檢測試劑和參考抑制劑。請與我們聯(lián)系以獲取基于定制的大量產(chǎn)品或單獨訂購組件。