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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章BioChain cfPure®無細胞核酸提取

BioChain cfPure®無細胞核酸提取

更新時間:2020-10-09點擊次數(shù):2041

 

BioChain成立于1994年,總部位于舊金山灣區(qū)。

BioChain是高質(zhì)量的生物樣品處理產(chǎn)品和分析服務(wù)的,用于推進轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué),伴隨診斷和臨床產(chǎn)品研發(fā)。BioChain的產(chǎn)品可用于DNA和RNA測序,PCR和RT-PCR,基因表達分析,DNA和RNA純化,蛋白質(zhì)提取和純化以及蛋白質(zhì)表達分析。從臨床樣品收集,樣品制備,測序到生物信息學(xué)分析,BioChain的新一代測序一站式服務(wù)將*改變整個行業(yè)。

除了我們生物標(biāo)本和樣品制備業(yè)務(wù)外,BioChain還涉足臨床應(yīng)用,提供癌癥和生殖健康方面的臨床基因組學(xué)診斷產(chǎn)品和臨床試驗服務(wù)。BioChain致力于通過我們的持續(xù)過程改進計劃以具競爭力的價格獲得高質(zhì)量的產(chǎn)品和服務(wù)。BioChain建立了全面的質(zhì)量保證計劃,以滿足客戶的滿意,并為我們的內(nèi)部生產(chǎn)設(shè)施維持ISO9001:2015和ISO 13485:2016認證。

BioChain cfPure®無細胞核酸提取

cfPure®無細胞核酸提取的功能

cfPure®無細胞DNA提取試劑盒 是基于磁珠的DNA提取試劑盒,旨在從人血漿和血清中分離循環(huán)的無細胞DNA(cfDNA)。該套件具有快速,簡單和自動化友好的協(xié)議,使用戶能夠快速提取高質(zhì)量的cfDNA,該DNA可用于下游應(yīng)用,包括實時PCR,數(shù)字PCR和下一代測序。

cfPure®無細胞核酸提取

 

高cfDNA的質(zhì)量,純度和產(chǎn)量

cfPure®無細胞DNA提取試劑盒是BioChain基于磁珠的新型DNA提取試劑盒,旨在從血漿,血清和尿液中分離循環(huán)的無細胞DNA(cfDNA)。該試劑盒提供了一種簡單且自動化友好的協(xié)議,使用戶可以從一系列樣品量中快速提取高質(zhì)量的下游cfDNA。

應(yīng)用范圍:

從血漿,血清和尿液中提取高質(zhì)量的無細胞DNA,用于下一代測序(NGS),亞硫酸氫鹽測序,PCR,qPCR,ddPCR和其他苛刻的應(yīng)用。

優(yōu)點和特點:

  • 用途廣泛: 從<1mL至> 10mL的血清或血漿中提取–在單管或24至96孔板中
  • 自動化友好: 在KingFisher™和液體處理儀器上,提取過程大約需要50分鐘
  • 高效省時: 手動提取方案只需不到75分鐘
  • 具有成本效益: 從1毫升血漿中每次提取的*3美元(250毫升試劑盒的標(biāo)價)
  • 洗脫體積:  15 µL至50 µL

cfDNA試劑盒產(chǎn)生可重復(fù)的結(jié)果

 

血漿ID回收的總DNA(ng)
一種7.00
一種7.05
乙32.45
乙33.50
C26.80
C27.70
d10.90
d10.90

表1.為了評估可重復(fù)性,使用cfPure®無細胞DNA提取試劑盒從4種不同人類供體的1 mL血漿中提取DNA,一式兩份。

相對于競爭的cfDNA的有效回收

提取套件樣品編號每
毫升血漿中回收的cfDNA(ng)

每毫升血漿(ng)115 nt ALU序列cfDNA(通過PCR)
競爭對手T1個4.991.97
BioChain的cfPure1個6.352.53
競爭對手T26.183.21
BioChain的cfPure28.283.93
競爭對手T36.933.79
BioChain的cfPure37.503.87

表2.通過cfPure®無細胞DNA提取試劑盒或競爭對手的基于磁珠的無細胞DNA提取試劑盒,從來自三個不同供體的2 mL血漿中純化了cfDNA。通過熒光方法或qPCR使用與ALU序列DNA互補的引物評估DNA的回收率。

 

 

圖1.cfPure®無細胞DNA試劑盒用于從5 ml健康人血漿中分離DNA?;厥盏?2 ng的cfDNA(150-200 bp片段),并帶有少量gDNA污染。

 

 

圖2.使用各種樣品體積(.2,.5、1、5、10ml)從兩個人類供體的血漿中提取cfDNA。然后通過Qubit高靈敏度DNA測定法定量cfDNA產(chǎn)量。相對于初始樣本量繪制產(chǎn)量,并計算其趨勢線的R 2值。

cfDNA由終用戶通過NGS驗證

通過cfPure萃取cfDNA ® cfDNA Extraction試劑盒是*的下游應(yīng)用如NGS。在第三方研究cfDNA從10毫升的人血漿用BioChain公司的cfPure提取從4個供體®(B),競爭對手T的(T),和競爭對手Q的(Q,基于列的)cfDNA提取試劑盒。然后為每個樣品構(gòu)建文庫,并進行全基因組測序。從數(shù)據(jù)分析來看,三種提取方法均未顯示出明顯的性能差異:插入片段大小,作圖率,全基因組覆蓋率,取代率和GC偏倚。

 

 

圖3.相對于插入物長度的讀取數(shù)。每條曲線代表來自相同提取方法的4個樣品的平均值。

 

 

圖4.通過將特定GC含量的讀數(shù)數(shù)除以所有GC箱的平均讀數(shù)數(shù)來計算GC箱中的覆蓋率或深度的百分比。數(shù)字1表示平均覆蓋率,小于1的數(shù)字表示低于平均覆蓋率,而大于1的數(shù)字表示高于平均覆蓋率。

自動化就緒

cfPure®無細胞DNA提取試劑盒適用于KingFisher™和液體處理儀器。借助KingFisher™Flex和BioChain的cfPure®無細胞DNA提取試劑盒,可在50分鐘內(nèi)提取多達96個1 ml樣品,或在一小時內(nèi)提取24個5 ml樣品。

 

 

圖5.使用KingFisher Flex自動純化系統(tǒng)和BioChain的cfPure®系統(tǒng)(cfPure KingFisher)或競爭對手的試劑盒(Competitor T KingFisher)從4 mL EDTA血漿中純化cfDNA。將兩種自動提取方法與使用cfPure®(cfPure手動)進行的手動提取進行了比較。使用與ALU重復(fù)序列互補的引物通過qPCR評估cfDNA的回收率。

 

 

 

技術(shù)指標(biāo)

樣本類型(常規(guī)):液體樣品(例如血清),dsDNA
高吞吐量兼容性:自動化協(xié)議
下游應(yīng)用:下一代測序,PCR,實時PCR
生產(chǎn)線:cfPure®
產(chǎn)品尺寸:1套
運輸條件:室內(nèi)溫度

 

套件內(nèi)容

K5011610K5011625K5011625MA
2 x 1.33 mL cfPure無細胞DNA磁珠5 x 1.33 mL cfPure無細胞DNA磁珠5 x 1.33 mL cfPure無細胞DNA磁珠
1 x 115 mL cfPure無細胞DNA裂解/結(jié)合液3 x 95 mL cfPure無細胞DNA裂解/結(jié)合液1 x 95 mL cfPure無細胞DNA裂解/結(jié)合液
2 x 55 mL cfPure無細胞DNA洗滌液5 x 55 mL cfPure無細胞DNA洗滌液1 x 65 mL cfPure無細胞DNA洗滌液
1 x 6 mL cfPure無細胞DNA洗脫液1 x 15 mL cfPure無細胞DNA洗脫液1 x 15 mL cfPure無細胞DNA洗脫液

 

引文

 

血液檢測與PET-CT成像相結(jié)合的可行性,以篩查癌癥并指導(dǎo)干預(yù)

Lennon AM,Buchanan AH,Kinde I等。

[2020年4月28日在線發(fā)布]。 科學(xué)。doi:10.1126 / science.abb9601

 

 

  用 重復(fù)元素測序評估非整倍性。

Douville C,Cohen JD,Ptak J,Popoli M,Schaefer J,Silliman N,Dobbyn L,Schoen RE,Tie J,Gibbs P,Goggins M,Wolfgang CL,Wang TL,Shih IM,Karchin R,Lennon AM,Hruban RH ,Tomasetti C,Bettegowda C,Kinzler KW,Papadopoulos N,VogelsteinB。

美國國家自然科學(xué)委員會。2020 Mar 3; 117(9):4858-4863。doi:10.1073 / pnas.1910041117。Epub 2020 2月19日。PMID:32075918

 

 

游離DNA 在 癌癥: 當(dāng)前 的見解。

Fettke H,Kwan EM,Azad AA。

Cell  Oncol(Dordr)。2019二月; 42(1):13-28。doi:10.1007 / s13402-018-0413-5。EPUB 2018年10月26日。評論。

PMID:30367445

 

 

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