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技術(shù)文章

Technical articles

當(dāng)前位置:首頁(yè)技術(shù)文章bellbrooklabs Transcreener cGAMP說(shuō)明書(shū)

bellbrooklabs Transcreener cGAMP說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間:2020-12-29點(diǎn)擊次數(shù):3076

bellbrooklabs Transcreener cGAMP說(shuō)明書(shū)

bellbrooklabs Transcreener® cGAMP cGAS

 

bellbrooklabs利用Transcreener cGAMP cGAS分析法發(fā)現(xiàn)cGAS抑制劑

Transcreener cGAMP cGAS分析法直接測(cè)量由環(huán)狀GMP-AMP合酶(cGAS,C6orf150、2'3'-cGAMP合酶)產(chǎn)生的環(huán)狀GMP-AMP  (cGAMP)。通過(guò)測(cè)量cGAMP的產(chǎn)量,研究人員可以有效地確定 cGAS酶的活性。該測(cè)定法提供了一個(gè)強(qiáng)大的工具,可以篩選整個(gè)化合物庫(kù)中的cGAS調(diào)節(jié)劑,以 幫助找到針對(duì)cGAS-STING途徑的新療法。

cGAS是STING途徑中的重要信使

真核細(xì)胞胞質(zhì)溶膠中DNA的存在是感染或細(xì)胞損傷的指示,并且在I型干擾素(IFN)誘導(dǎo)的驅(qū)動(dòng)下引發(fā)強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)。cGAS是細(xì)胞質(zhì)中雙鏈DNA的非常靈敏的傳感器。DNA的結(jié)合激活了該酶,從而產(chǎn)生了*的環(huán)狀二核苷酸第二信使cGAMP,它充當(dāng)STING(干擾素基因刺激劑)受體的激動(dòng)劑,從而導(dǎo)致I型干擾素應(yīng)答。

cGAS STING途徑

直接檢測(cè)cGAMP以測(cè)量cGAS酶活性

Transcreener cGAMP FP分析-了解更多信息
cGAS分析示意圖FP
 
 

Transcreener cGAMP cGAS FP檢測(cè)技術(shù)手冊(cè)(PDF)

 
cGAMP TR-FRET分析-了解更多
cGAS分析示意圖TR-FRET
 
 

應(yīng)用領(lǐng)域

  • 測(cè)量cGAS的酶活性
  • 篩選cGAS抑制劑的復(fù)合文庫(kù)
  • 量化抑制劑效力
  • 確定抑制劑-cGAS停留時(shí)間

特征

  • 直接檢測(cè)未標(biāo)記的cGAMP
  • 易于使用,同質(zhì),一步式
  • 初始速度條件下的穩(wěn)健分析Z'> 0.7
  • 遠(yuǎn)紅色熒光讀數(shù)大程度地減少了化合物干擾
  • 一種安全的非放射性方法
  • 可用于FP或TR-FRET讀數(shù)

易于使用,混合閱讀,HTS就緒分析

Transcreener cGAS分析法采用易于HTS使用,混合閱讀的格式。運(yùn)行您的酶反應(yīng),添加 Transcreener試劑,然后閱讀板。該測(cè)定與96、384和1536孔格式兼容。

在cGAS初始速度下檢測(cè)cGAMP

當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)將原始數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為cGAMP時(shí),該測(cè)定法顯示線(xiàn)性。cGAS被雙鏈DNA激活,并需要ATP和GTP底物來(lái)生產(chǎn)cGAMP。

全長(zhǎng)人cGAS滴定

cGAS酶滴定

線(xiàn)性響應(yīng)

抑制劑篩選和執(zhí)行SAR

Transcreener cGAS分析法旨在以高通量格式篩選化合物庫(kù)。還可以使用該測(cè)定法進(jìn)行隨訪(fǎng)SAR,從而輕松確定抑制劑的效價(jià)。

1600復(fù)合先導(dǎo)篩

獲取準(zhǔn)確的劑量響應(yīng)測(cè)量

cGAS抑制劑劑量反應(yīng)曲線(xiàn)

說(shuō)明了cGAS酶的DNA和底物依賴(lài)性

該測(cè)定法準(zhǔn)確地證明了cGAS酶的特征。在GTP和ATP均存在的情況下,雙鏈DNA激活了產(chǎn)生cGAMP的酶。一個(gè)45個(gè)堿基對(duì)的ISD(干擾素刺激性DNA)和一個(gè)60個(gè)堿基對(duì)的HSV(單純皰疹病毒)DNA均可激活該酶。該測(cè)定法對(duì)cGAMP具有很高的親和力,即使存在其他核苷酸也可以檢測(cè)。

dsDNA激活cGAS酶

cGAS DNA滴定

對(duì)ATP和GTP的依賴(lài)

依賴(lài)于ATP和GTP的cGAS酶

出色的信號(hào)穩(wěn)定性

該測(cè)定顯示24小時(shí)以上的信號(hào)穩(wěn)定性。這樣的印版穩(wěn)定性對(duì)于大型的高通量篩選至關(guān)重要,由于大量樣品需要大量時(shí)間才能完成。

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)包括ATP,GTP,dsDNA和cGAMP的滴定。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)讀取相同的板。

cGAS分析信號(hào)穩(wěn)定性
 

cGAS分析服務(wù)

有興趣推進(jìn)您的程序,但不想內(nèi)部進(jìn)行分析嗎?我們的科學(xué)家可以提供幫助!BellBrook的科學(xué)家將利用其豐富的生物化學(xué)和酶學(xué)專(zhuān)業(yè)知識(shí)與您合作,并加快您的cGAS計(jì)劃。

分析開(kāi)發(fā)服務(wù)

潛在客戶(hù)發(fā)現(xiàn)服務(wù)包括:

  • 抑制劑篩選–識(shí)別或確認(rèn)靶標(biāo)的活性。
  • 抑制劑效能分析–靶標(biāo)和/或相關(guān)蛋白的劑量反應(yīng)??焖買(mǎi)C 50結(jié)果。
  • 停留時(shí)間測(cè)量–使用“跳躍稀釋”酶法測(cè)定k off。
  • 作用機(jī)理研究–動(dòng)力學(xué)分析定義了抑制方式。

聯(lián)系我們以了解更多信息

請(qǐng)?zhí)顚?xiě)下面的表格。我們將迅速做出響應(yīng),以使對(duì)話(huà)進(jìn)展順利,并了解我們?nèi)绾翁峁椭N覀儽3质虑榉稚?,保密和?zhuān)業(yè)。

 
 

在主要的多模閱讀器上驗(yàn)證了遠(yuǎn)紅FP和TR-FRET讀數(shù)

供應(yīng)商儀器
bioteklogoTriStar²SLB 942
密特拉拉斯LB 943
 
bioteklogoCytation™5
Cytation™3
Cytation™1
Synergy™H1
Synergy™2 / H4 / 4
Synergy™HTX
Synergy™Neo 2
 
BMGLABTECH徽標(biāo)POLARstar ®歐米茄
FLUOSTAR ®歐米茄
PHERAstar ® FSX
PHERAstar ®加/ FS
CLARIOstar ® /加
 
MDS AT徽標(biāo)分析師® GT / HT
雙子座® XPS / EM
的SpectraMax ® M2 / M2e的
的SpectraMax ® M5 /的M5e / FlexStation ® 3
的SpectraMax ®范式
 
珀金埃爾默標(biāo)志的EnVision ® /的EnVision ® XCITE
 
tecanLogo無(wú)限® M1000 / M1000Pro / Safire2™
無(wú)限® M200
無(wú)限® F500
無(wú)限® F200 /超進(jìn)化
Spark™10M

包含什么

 
零件筆記
cGAMP抗體對(duì)二核苷酸cGAMP具有特異性的抗體。
示蹤劑當(dāng)被置換時(shí),取決于測(cè)定形式,可以在FP或TR-FRET中讀取熒光的變化。
停止并檢測(cè)緩沖區(qū)B,10X可以用于終止酶反應(yīng)以終止終點(diǎn)讀數(shù)的緩沖液。
三磷酸腺苷ATP可用于酶反應(yīng)和標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
GTPGTP可用于酶反應(yīng)和標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
cGAMPcGAMP可用于創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
干擾素刺激DNAISD是用于激活cGAS酶的45 bp寡聚體。

您將需要什么

 
零件筆記
cGAS酶您可以直接通過(guò)BellBrook Labs購(gòu)買(mǎi)活性cGAS酶 。
酶緩沖液我們經(jīng)常使用含有20mM TRIS(pH 7.5)中,5毫摩爾MgCl酶緩沖液2,0.01%的Brij-35和1%DMSO(測(cè)試化合物溶劑)。使用適合您的酶條件的緩沖液
檢測(cè)板您可以直接通過(guò)BellBrook Labs購(gòu)買(mǎi)測(cè)定板。

 

FP-需要一個(gè)具有非粘合表面的全黑色印版。我們建議康寧384孔板,目錄 #4514。

TR-FRET-需要具有無(wú)粘合表面的全白色板。我們建議使用康寧384孔板Cat。#4513

 

Transcreener cGAMP cGAS分析試劑盒

*

 
貨號(hào)。產(chǎn)品描述價(jià)錢(qián)
3024-1KTranscreener cGAMP cGAS FP測(cè)定法(1,000測(cè)定法,384孔)$ 798.00
3024-10KTranscreener cGAMP cGAS FP測(cè)定法(10,000測(cè)定法,384孔)$ 4,615.00
3024-100KTranscreener cGAMP cGAS FP測(cè)定(10 X 10,000測(cè)定,384孔)$ 23,075.00
3025-1KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET測(cè)定(1,000測(cè)定,384孔)$ 875.00
3025-10KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET測(cè)定(10,000測(cè)定,384孔)$ 4,989.00
3025-100KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET測(cè)定(10 X 10,000測(cè)定,384孔)$ 24,950.00
 

cGAS酶訂購(gòu)信息

 

 
貨號(hào)。產(chǎn)品描述價(jià)錢(qián)
2227重組cGAS酶,活性的,人的,全長(zhǎng),10 µg$ 399.00
2228重組cGAS酶,活性的,人的,全長(zhǎng),100 µg$ 1,398.00
 
 

cGAS篩選套件

*當(dāng)以1.75μg/ mL(30 nM)使用時(shí),包括用于各孔的足夠酶

 
貓。沒(méi)有。產(chǎn)品描述價(jià)錢(qián)
3024-1K-B包括Transcreener cGAS FP Assay 1K試劑盒和20 µg人類(lèi)cGAS酶$ 1,275.00
3024-10K-B包括Transcreener cGAS FP Assay 10K試劑盒和200 µg人類(lèi)cGAS酶$ 6,670.00
3025-1K-B包括Transcreener cGAS TR-FRET Assay 1K試劑盒和20 µg人類(lèi)cGAS酶$ 1,345.00
3025-10K-B包括Transcreener cGAS TR-FRET Assay 10K試劑盒和200 µg人類(lèi)cGAS酶$ 6,995.00
 

FP檢測(cè)板

 

貨號(hào)。產(chǎn)品描述價(jià)錢(qián)
2233康寧96孔黑色檢測(cè)板(#3686),3片裝(200+檢測(cè))$ 40.00
2229康寧384孔黑色檢測(cè)板(#4514),3包(1,000多種檢測(cè))$ 45.00
2230康寧384孔黑色檢測(cè)板(#4514),30包(10,000+檢測(cè))$ 400.00

 

TR-FRET檢測(cè)板


貨號(hào)。產(chǎn)品描述價(jià)錢(qián)
2234康寧96孔白色檢測(cè)板(#3642),3包(200多種檢測(cè))$ 40.00
2231康寧384孔白色檢測(cè)板(#4513),3包(1,000多種檢測(cè))$ 50.00
2232康寧384孔白色檢測(cè)板(#4513),30包(10,000+檢測(cè))$ 450.00 

 

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