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haemtech活化蛋白C產(chǎn)品目錄

更新時(shí)間:2021-02-20點(diǎn)擊次數(shù):1884

 

haemtech活化蛋白C產(chǎn)品目錄


活化蛋白C(APC)滅活因子Va
代表了APC對(duì)因子Va的蛋白水解失活,其中:PS =蛋白S,PCPS =磷脂囊泡(或細(xì)胞表面),Ca ++ =鈣離子。因子Va失活形成因子Vai的原因是APC在三個(gè)特定位點(diǎn)對(duì)因子Va重鏈(94K)進(jìn)行了蛋白水解(實(shí)心箭頭)(1,2)。這些切割位點(diǎn)在因子Va重鏈中的位置如下:(人:R306,R506和R679)和(牛:R306,R505和R662)。輔因子分子的*滅活需要在精氨酸306位裂解。活化蛋白C在精氨酸306上的切割僅在存在膜的情況下發(fā)生,并且需要事先在精氨酸505上切割重鏈。APC對(duì)因子Va輕鏈進(jìn)行的蛋白水解僅在牛分子中發(fā)生,并且對(duì)于滅活不是必需的(虛線箭頭)。

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    尺寸50微克
    公式50%(vol / vol)甘油/ H 2 O
    貯存-20°攝氏度
    純度通過(guò)SDS-PAGE,> 95%
    活性測(cè)定顯色測(cè)定
    保質(zhì)期(正確存放)12個(gè)月
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     安全數(shù)據(jù)表
    尺寸50微克
    公式20 mM Tris,150 mM NaCl,pH 7.4
    貯存-80°攝氏度
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活化蛋白C(APC)是一種抗凝血絲氨酸蛋白酶,來(lái)源于兩條鏈,依賴于維生素K的酶原,蛋白C(3-7)。α-凝血酶和血栓調(diào)節(jié)蛋白之間的復(fù)合物催化蛋白C重鏈中Arg-12(牛中的Arg-14)的單裂,從而生成活化的C蛋白。幾種非生理相關(guān)的蛋白酶,例如RVV-X激活劑,胰蛋白酶和PROTAC也能夠激活C蛋白。

APC用作抗凝血?jiǎng)纱呋o因子Va和VIIIa因子的蛋白水解失活,從而導(dǎo)致凝血酶原酶和Xase因子復(fù)合物的抑制。因子Va和VIIIa的失活都是Ca2 +和磷脂依賴性的。維生素K依賴的輔因子蛋白S通過(guò)與APC形成1:1的復(fù)合物(Kd = 6x10-9M)適度提高了失活率(8)。

有幾個(gè)因素減弱了APC的抗凝活性。Xa因子通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)因子Va上相似的結(jié)合位點(diǎn)來(lái)保護(hù)因子Va免受APC的蛋白水解作用。凝血酶也已被提議通過(guò)蛋白S的蛋白水解失活作為APC的調(diào)節(jié)劑。此外,APC還受循環(huán)肝素依賴性蛋白的調(diào)節(jié)C抑制劑(PAI-3),肝素非依賴性循環(huán)蛋白C抑制劑,血小板衍生的蛋白C抑制劑和PAI-1。據(jù)報(bào)道,在APC和兩種PAI類型之間形成的復(fù)合物可說(shuō)明在輸注APC或體內(nèi)產(chǎn)生APC時(shí)觀察到的纖維蛋白溶解增加。

除了我們的標(biāo)準(zhǔn)APC制劑以外,還可以使用含有Dansyl-EGR-氯甲基甲酮的活性位點(diǎn)封閉形式。

活化的蛋白C是由純化的蛋白C通過(guò)凝血酶激活,然后進(jìn)行離子交換色譜法制得的(4)。APC以50%(體積/體積)甘油/水的形式提供,應(yīng)儲(chǔ)存在-20oC下。通過(guò)SDS-PAGE分析確定純度,并使用生色底物測(cè)定法測(cè)量活性。還按照APC耐藥性分析的要求測(cè)試了所有生產(chǎn)批次的APC延長(zhǎng)正常人血漿aPTT的能力(10,11)。每個(gè)批次的測(cè)試結(jié)果均以aPTT(+/- APC)比(10nM APC)的形式提供。

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