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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章qa-bio E-EF01說明書

qa-bio E-EF01說明書

更新時間:2021-05-20點擊次數(shù):1799

qa-bio E-EF01說明書

 

Endo F1

遠(yuǎn)藤F1圖片

Endo F1從肽和蛋白質(zhì)中裂解出高甘露糖和一些雜合型N-聚糖

 

部件號–酶量
E-EF01 – 60 µLs¹ 
E-EF01-20 – 20 µls¹ 
E-EF01-200 – 200 µls²¹
  含緩沖液
  ²僅含酶

 

產(chǎn)品描述

 

內(nèi)切F1,內(nèi)切糖苷酶F1,內(nèi)-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶F

Endo F1裂解天冬酰胺連接的高甘露糖和一些雜合寡糖。核心巖藻糖基化將活性降低了50倍。糖苷內(nèi)切酶F1將水解含有高甘露糖鏈的硫酸鹽。其在寡糖的二乙?;鶜ざ呛诵闹械膬蓚€N-乙酰氨基葡糖殘基之間裂解,產(chǎn)生截短的糖分子,其中一個N-乙酰氨基葡糖殘基保留在天冬酰胺上。相反,PNGase F可以完整清除寡糖。

附加遠(yuǎn)藤?F產(chǎn)品
內(nèi)切糖苷酶F2釋放雙觸角和高甘露糖聚糖(以40X減小的速率)
內(nèi)切糖苷酶F3將釋放triantennarry和巖藻糖基雙觸角N-聚糖
的遠(yuǎn)藤?F多套件包括每個遠(yuǎn)藤?F酶和它們的緩沖器中的20個μLs。

源重組Elizabethkingia miricola(是腦膜膿毒性金黃)在大腸桿菌

EC 3.2.1.96

內(nèi)切F1特異性裂解所有與天冬酰胺連接的高甘露糖和一些雜合寡糖

內(nèi)容
在20mM的Tris-HCl 60酶微升等分試樣(1 U),pH 7.5中

隨附20 µL和60 µL的包裝尺寸:
5倍反應(yīng)緩沖液– 250 mM磷酸鈉,pH 5.5

比活度> 16 U / mg
活度> 17 U / ml

分子量32,000道爾頓

建議用法
1.在Eppendorf管中加入200 µg糖蛋白。用去離子水將最終體積調(diào)整為38 µl。
2.添加10 µl 5x反應(yīng)緩沖液5.5。3 
.添加2.0 µl Endo F1。在37°C下孵育1小時。

比活性
定義為在37°C,pH 5.5下,在1分鐘內(nèi)催化1微摩爾變性核糖核酸酶B(RNase B)釋放N-連接寡糖所需的酶量。通過SDS-PAGE監(jiān)測切割(切割的RNase B遷移更快)。

儲存將酶保存在4?C下??。

穩(wěn)定性正確存放后至少可穩(wěn)定12個月。幾天暴露于環(huán)境溫度不會降低活性。

純度如下測試內(nèi)切糖苷酶F1對蛋白酶的污染。將10μg變性的BSA與2μL酶在37oC下孵育24小時。經(jīng)處理的BSA的SDS-PAGE分析未顯示降解跡象。

生產(chǎn)宿主菌株已經(jīng)過廣泛測試,不會產(chǎn)生任何可檢測的糖苷酶。

 

 

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