信息

3,5-difluoro-4-hydroxybenzlidene-imidazolinone-2-oxime-1-benzoimidazole (OBI)

分子式：

C 19 H 13 F 2 N 5 O 3

分子量：

397.34

CAS 名稱(chēng)/編號(hào)：

熒光光譜

RedBroccoli TM /OBI 在 pH 7.4 緩沖液中的吸收和熒光發(fā)射光譜。

演示： 凍干染料

質(zhì)量保證：產(chǎn)品通過(guò)1 H NMR 和 LC-MS進(jìn)行分析， 并通過(guò) HPLC 提供純度 > 95%。

使用聲明：本產(chǎn)品僅供研究使用，不得用于任何其他目的，包括但不限于未經(jīng)授權(quán)的商業(yè)用途、體外診斷用途、離體或體內(nèi)治療用途或任何類(lèi)型的食用或應(yīng)用于人類(lèi)或動(dòng)物。由于熒光團(tuán)和適體的高度特異性，我們無(wú)法預(yù)測(cè) Lucerna TM 產(chǎn)品在其客戶(hù)系統(tǒng)中的表現(xiàn)，也無(wú)法對(duì)其負(fù)責(zé)。使用 Lucerna TM 產(chǎn)品的研究人員應(yīng)進(jìn)行優(yōu)化研究，以實(shí)現(xiàn)其預(yù)期應(yīng)用的最佳結(jié)果。

數(shù)據(jù)

圖 1. Red Broccoli TM -OBI 復(fù)合物在細(xì)胞和體外表現(xiàn)出更高的光穩(wěn)定性。Red Broccoli TM熒光團(tuán)（OBI 與 BI，各 20 µM）的細(xì)胞內(nèi)光穩(wěn)定性通過(guò)對(duì) Red Broccoli TM表達(dá)細(xì)胞的連續(xù)照射進(jìn)行評(píng)估。Red Broccoli TM -OBI 在超過(guò) 10 秒的時(shí)間內(nèi)保持了 >75% 的紅色熒光，而 Red Broccoli TM -BI 在約 0.2 秒內(nèi)失去了約 50% 的綠色熒光。比例尺，10 µm。

圖 2. OBI 增強(qiáng)的細(xì)胞穩(wěn)定性能夠使用基于 Red Broccoli TM的 SAM 生物傳感器對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的內(nèi)源性 SAM 動(dòng)力學(xué)進(jìn)行成像。（a）本實(shí)驗(yàn)中使用的SAM傳感器示意圖。( b ) 表達(dá)基于Red Broccoli TM的 SAM 傳感器（頂部）或單獨(dú)的Red Broccoli TM（底部）的 HEK293T 細(xì)胞使用 10 µM OBI 成像。在 0 分鐘用 50 mM 環(huán)亮氨酸處理以阻止 SAM 生物合成的傳感器表達(dá)細(xì)胞顯示細(xì)胞熒光迅速降低。120 分鐘后，將培養(yǎng)基更換為不含環(huán)亮氨酸的培養(yǎng)基（“洗出"），熒光隨時(shí)間恢復(fù)至基線水平。僅表達(dá) Red Broccoli TM 的細(xì)胞隨著時(shí)間的推移保持一致的紅色熒光。比例尺，20 µm。

圖 3.  BI 和 OBI 是 Broccoli TM和 Red Broccoli TM 的“即插即用"熒光團(tuán)。表達(dá)紅花椰菜、花椰菜或?qū)φ?RNA 的 HEK293T 細(xì)胞與 10 µM OBI ( ac ) 或 BI ( df )一起孵育。OBI 在表達(dá)紅花椰菜和西蘭花的細(xì)胞中均表現(xiàn)出紅色熒光，而 BI 在表達(dá)紅花椰菜和西蘭花的細(xì)胞中均表現(xiàn)出綠色熒光。但是在具有任一熒光團(tuán)的對(duì)照 RNA 表達(dá)細(xì)胞中均未觀察到熒光。細(xì)胞核用 Hoechst-33342 染色劑（藍(lán)色）標(biāo)記，并用 DAPI 和用于 BI 的 FITC 過(guò)濾器立方體或用于 OBI 的 TRITC 過(guò)濾器立方體成像。比例尺，10 µm。

參考

使用基于基因編碼的紅色熒光 RNA 傳感器對(duì)活哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的細(xì)胞內(nèi) S-腺苷甲硫氨酸動(dòng)力學(xué)進(jìn)行成像。Li X、Mo L、Litke JL、Dey SK、Suter SR、Jaffrey SR。J Am Chem Soc。2020 年 8 月 19 日；142(33)：14117-14124。