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技術(shù)文章

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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章BellBrook HTS 檢測(cè)簡介

BellBrook HTS 檢測(cè)簡介

更新時(shí)間:2021-09-07點(diǎn)擊次數(shù):2107



BellBrook HTS 檢測(cè)簡介

Transcreener 和 AptaFluor HTS Assays,使用直接檢測(cè)核苷酸和均質(zhì)熒光讀數(shù)的酶的通用高通量篩選分析


Transcreener® HTS Assays

使用直接檢測(cè)核苷酸和均質(zhì)熒光讀數(shù)的酶的通用、高通量篩選分析。

TRANSCREENER ADP 2檢測(cè)

激酶檢測(cè)
ATP酶測(cè)定

TRANSCREENER AMP 2 /GMP 2檢測(cè)

磷酸二酯酶測(cè)定
連接酶和合成酶測(cè)定
糖基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定
甲基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)

TRANSCREENER GDP 分析

GTP酶測(cè)定
差距分析
全球環(huán)境基金分析
糖基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定

TRANSCREENER UDP 2檢測(cè)

糖基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定

透光機(jī) CGAMP 檢測(cè)

cGAS 檢測(cè)

TRANSCREENER ADO CD73 檢測(cè)

CD73 檢測(cè)

對(duì)數(shù)以千計(jì)的目標(biāo)進(jìn)行分析。

  • Transcreener 檢測(cè)依賴于核苷酸的直接免疫檢測(cè),與復(fù)雜的酶偶聯(lián)檢測(cè)方案相比,這種檢測(cè)方法不易受到干擾。

  • 四種類型的 Transcreener 核苷酸檢測(cè)分析使您能夠更快、更有效地篩選數(shù)千種目標(biāo)酶。

  • 您選擇的 FP、FI 和 TR-FRET 讀數(shù);所有這些都具有遠(yuǎn)紅熒光和主要多模閱讀器的認(rèn)證性能。

  • 均質(zhì)、混合和讀取格式可用于終點(diǎn)分析或酶活性的連續(xù)監(jiān)測(cè)。

  • 過夜試劑和信號(hào)穩(wěn)定性意味著大型自動(dòng)化篩選中可靠、穩(wěn)健的篩選數(shù)據(jù)。

Transcreener:它是如何工作的

Transcreener 是一種通用檢測(cè)方法,可用于整個(gè)核苷酸依賴性酶家族。與其對(duì)大量特定反應(yīng)產(chǎn)物(例如磷酸化蛋白質(zhì)或脂質(zhì))使用單獨(dú)的測(cè)定法,不如對(duì)產(chǎn)生共同核苷酸產(chǎn)物的所有酶使用單核苷酸檢測(cè)測(cè)定法。例如,ADP 檢測(cè)可用作任何蛋白質(zhì)、脂質(zhì)或碳水化合物激酶的通用激酶測(cè)定方法。


Transcreener 檢測(cè)依賴于使用能夠根據(jù)單個(gè)磷酸基團(tuán)區(qū)分核苷酸的抗體對(duì)核苷酸的直接、高度特異性檢測(cè)。產(chǎn)物核苷酸與底物(例如,ADP 與 ATP 用于激酶測(cè)定)的選擇性范圍從 150 倍到 1000 倍以上。這種精確的選擇性允許在存在過量底物核苷酸的情況下檢測(cè)核苷酸酶產(chǎn)物(例如,在存在過量 ATP 的情況下檢測(cè) ADP 用于激酶測(cè)定),這是測(cè)量酶初始速度的必要條件。

為了產(chǎn)生信號(hào),Transcreener Assays 使用同質(zhì)、競(jìng)爭性免疫分析形式,其中抗體與高親和力熒光示蹤劑配對(duì)。被檢測(cè)的核苷酸取代示蹤劑會(huì)導(dǎo)致其熒光特性發(fā)生變化。FP 檢測(cè)是簡單的;它只需要示蹤劑和未修飾的抗體;極化的變化是由示蹤劑在移動(dòng)時(shí)增加的旋轉(zhuǎn)遷移率引起的。對(duì)于 TR-FRET 和 FI 格式,抗體與一種分子偶聯(lián),該分子在結(jié)合時(shí)會(huì)改變示蹤熒光的強(qiáng)度,而當(dāng)示蹤劑被置換時(shí),這種效果就會(huì)消失。

Transcreener:為什么直接檢測(cè)更適合 HTS

與任何其他核苷酸檢測(cè)分析相比,Transcreener 分析具有更少的試劑和更簡單的機(jī)制,這通常需要偶聯(lián)酶將核苷酸轉(zhuǎn)化為可以與報(bào)告酶產(chǎn)生信號(hào)的產(chǎn)物。每個(gè)偶聯(lián)酶和報(bào)告酶都是被篩選化合物的潛在靶標(biāo),這會(huì)增加假陽性或錯(cuò)過命中的風(fēng)險(xiǎn),并且需要額外的孔進(jìn)行反篩選。(一些 ADP 檢測(cè)分析甚至使用激酶作為偶聯(lián)酶,進(jìn)一步使它們用于激酶抑制劑篩選復(fù)雜化。)

混合讀取的簡單性

直接檢測(cè)還意味著該協(xié)議是簡單、最靈活的可用方案:運(yùn)行酶反應(yīng),添加具有終止混合物的 Transcreener 試劑,并讀取板。或者可以在酶反應(yīng)開始時(shí)加入Transcreener檢測(cè)試劑,持續(xù)監(jiān)測(cè)酶活性;例如,用于使用“跳躍稀釋"激酶測(cè)定測(cè)量抑制劑停留時(shí)間。一些耦合方法需要額外的液體添加和孵育步驟,這使化驗(yàn)自動(dòng)化變得復(fù)雜并妨礙它們以連續(xù)模式運(yùn)行。

使用生化分析測(cè)量藥物-靶標(biāo)停留時(shí)間的指南

使用生化分析測(cè)量藥物-靶標(biāo)停留時(shí)間的指南



FI & FP 檢測(cè)板

TR-FRET 檢測(cè)板




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