haemtech 人血管抑制素說(shuō)明書

人類“血管抑制素"。
說(shuō)明了人纖溶酶原分子內(nèi)選定的蛋白水解切割位點(diǎn)。彈性蛋白酶裂解纖溶酶原產(chǎn)生“血管抑制素"（kringles 1-4）或血管抑制素樣片段（kringles 1-3）。HTI 的“血管抑制素"產(chǎn)品源自纖溶酶原分子內(nèi)的單次切割，產(chǎn)生的產(chǎn)品包括 Kringles 1-4 以及彈性蛋白酶生成的產(chǎn)品中不存在的 NH2 末端 78 個(gè)氨基酸。（K1-K5 = 5 kringle 域，B-CHAIN = 纖溶酶的催化域，箭頭表示纖溶酶、彈性蛋白酶、HTI 的專有酶和纖溶酶原激活劑 (PA'S) 的蛋白水解切割位點(diǎn)）。

血管抑制素是葡萄糖纖溶酶原的單鏈蛋白水解片段，分子量約為 38,000。它是一種有效的血管生成抑制劑，最初是從荷瘤小鼠的血清和尿液中鑒定和分離出來(lái)的 (1)。據(jù)報(bào)道，小鼠蛋白質(zhì)從蘇氨酸 98 延伸到纈氨酸 440（從 glu-纖溶酶原的 NH2 末端編號(hào)）。這個(gè)小鼠纖溶酶原片段，以及人類的等價(jià)物，包括纖溶酶原五個(gè)三環(huán)結(jié)構(gòu)域中的四個(gè) (1)。

血管抑制素對(duì)血管生成的抑制與抑制內(nèi)皮細(xì)胞的增殖直接相關(guān) (1,2)。因?yàn)橐阎[瘤生長(zhǎng)依賴于血管生成，所以最初假設(shè)血管抑制素的抑制特性在阻止以實(shí)體瘤形式表達(dá)的各種癌癥方面具有臨床效用。此后在動(dòng)物模型系統(tǒng)中進(jìn)行的研究表明，重組血管抑制素可有效抑制腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移 (3,4)。

已經(jīng)鑒定了許多將纖溶酶原轉(zhuǎn)化為血管抑制素或至少轉(zhuǎn)化為血管抑制素樣片段的酶。這些酶包括幾種基質(zhì)金屬蛋白酶以及尿激酶和腫瘤細(xì)胞來(lái)源的還原酶 (5-10)。負(fù)責(zé)體內(nèi)血管抑制素形成的確切酶或機(jī)制尚不清楚，據(jù)信可能存在多種途徑將纖溶酶原轉(zhuǎn)化為血管抑制素。

結(jié)構(gòu)/功能研究表明前三個(gè) kringle 結(jié)構(gòu)域（而不是第四個(gè)）負(fù)責(zé)血管抑制素的抑制特性，去除第四個(gè) kringle 結(jié)構(gòu)域?qū)嶋H上可能會(huì)產(chǎn)生更有效的抑制劑 (11)。

HTI 的“血管抑制素"產(chǎn)品是通過(guò)使用專有酶制劑對(duì)純化的人葡萄糖纖溶酶原進(jìn)行有限蛋白水解生產(chǎn)的。該片段的 NH2 末端序列與人葡萄糖纖溶酶原 (Glu-1) 相同，分子終止于脯氨酸 452，因此比“天然"或彈性蛋白酶衍生產(chǎn)品大，表觀分子量約為 50,000。與真正的血管抑制素一樣，該產(chǎn)品在生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞增殖試驗(yàn)中顯示出抗增殖作用。該產(chǎn)品在 20mM Hepes、0.15M NaCl、pH 7.4 中配制，應(yīng)在 -70oC 或以下冷凍儲(chǔ)存。