Sulfo-NHS-LC-生物素說明書

更新時間：2022-09-15

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Sulfo-NHS-LC-生物素說明書

目錄號

A8003

apexbt A8003 胺反應(yīng)性生物素化試劑，長鏈

100毫克

背景

Sulfo-NHS-LC-biotin (Sulfosuccinimidyl 6-(biotinamido) Hexanoate) 是一種胺反應(yīng)性生物素化劑。作為 NHS-LC-生物素的水溶性類似物，Sulfo-NHS-LC-生物素在 NHS 環(huán)結(jié)構(gòu)上含有一個帶負(fù)電荷的磺酸基，在分子內(nèi)產(chǎn)生足夠的極性，使其可以直接加入到水性反應(yīng)中而無需預(yù)先溶解有機(jī)溶劑。Sulfo-NHS-LC-生物素通過其 NHS 酯與蛋白質(zhì)和其他分子中的胺基共價結(jié)合，形成酰胺鍵并釋放 N-羥基琥珀酰亞胺。Sulfo-NHS-LC-生物素在共價修飾分子和雙環(huán)生物素環(huán)之間的長度 (22.4 A) 比 NHS-生物素 (13.5 A) 更長，這為探針提供了更大的機(jī)會到達(dá)深埋在內(nèi)部的結(jié)合位點蛋白質(zhì)的表面平面。

參考

生物共軛技術(shù)，第 2 版。作者：Greg T.Hermanson（Pierce Biotechnology，Thermo Fisher Scientific，Rockford，IL）。學(xué)術(shù)出版社（Elsevier 的印記）：倫敦、阿姆斯特丹、伯靈頓、圣地亞哥。2008. 國際標(biāo)準(zhǔn)書號 978-0-12-370501-3。

產(chǎn)品引用

1. 岳西華，Neeraj Tiwari，等?！癟ankyrase-1 介導(dǎo)的 Golgin45 降解以 Rab2-GTP 依賴性方式調(diào)節(jié)糖基轉(zhuǎn)移酶運(yùn)輸和蛋白質(zhì)糖基化。" 通訊生物學(xué)。2021 年 12 月 7 日；4(1):1370。 PMID:34876695
2.賈J，岳X，等?！癒DEL 受體是一種細(xì)胞表面受體，通過網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的運(yùn)輸載體在質(zhì)膜和高爾基體之間循環(huán)。" 細(xì)胞分子生命科學(xué)。2020；10.1007/s00018-020-03570-3。 PMID:32562023
3. 吳中，何德，等?！坝糜跈z測銅綠假單胞菌的雙峰（SERS 和比色）適體傳感器。" 米克羅希姆學(xué)報。2018 年 10 月 31 日；185(11):528。 PMID:30382404
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特征

• 蛋白質(zhì)標(biāo)記— 生物素化抗體，以促進(jìn)使用鏈霉親和素樹脂或探針進(jìn)行固定、純化或檢測
• 細(xì)胞表面標(biāo)記 —不穿透質(zhì)膜，僅對整個細(xì)胞的表面蛋白質(zhì)進(jìn)行生物素化
• 胺反應(yīng)性— 與伯胺 (-NH2)反應(yīng)，例如賴氨酸側(cè)鏈，或 N-末端胺
• 可溶性——與普通 NHS 酯化合物相比，帶電荷的磺基-NHS 基團(tuán)增加試劑水溶性
• 不可逆——形成酰胺鍵；間隔臂不能被切割
• 中等長度——間隔臂為 22.4 埃；在足夠的長度（生物素結(jié)合的空間位阻最小）和適中的質(zhì)量之間提供出色的平衡

化學(xué)性質(zhì)

貯存	-20°C儲存本品在溶液中不穩(wěn)定，使用前請立即溶解。
重量	556.6
CAS號	127062-22-0
公式	C 20 H 29 N 4 NaO 9 S 2
同義詞	生物素氨基己酸3-磺基-N-羥基琥珀酰亞胺酯鈉鹽
化學(xué)名稱	2,5-二氧代-1-[6-[5-(2-氧代-1,3,3a,4,6,6a-六氫噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)戊酰氨基]己酰氧基]吡咯烷-3-磺酸；鈉
自衛(wèi)隊	下載自衛(wèi)隊
典型的微笑	C1C(C(=O)N(C1=O)OC(=O)CCCCCNC(=O)CCCCC2C3C(CS2)NC(=O)N3)S(=O)(=O)O.[Na]
運(yùn)輸條件	用藍(lán)冰運(yùn)送，或根據(jù)其他要求運(yùn)送。
一般提示	為獲得更高的溶解度，請將試管加熱至 37°C，并在超聲波浴中搖晃片刻。我們不建議長期儲存溶液，請盡快用完。

協(xié)議

生物素化方法[1]：
樣本	心肌細(xì)胞
制備方法	溶于水、DMSO 或 DMF。
反應(yīng)條件	0.5 mg/ml，37oC 2 小時
應(yīng)用	Sulfo-NHS-LC-生物素以 0.5 mg/ml 的濃度溶解在 PBS 中。然后將其與心肌細(xì)胞在 37oC 下孵育 2 小時。之后，將細(xì)胞在含有 100 mM 甘氨酸的冷 PBS 中洗滌兩次，并在單獨的冷 PBS 中洗滌兩次，以去除多余的生物素試劑。為了捕獲生物素化的蛋白質(zhì)，將 100 μl 鏈霉親和素瓊脂糖樹脂與每 100 μg 樣品在 4oC 下孵育 16 小時。使用含有 40 mg/mL 二硫蘇糖醇的 Laemmli 2X 樣品緩沖液在 60oC 下洗脫捕獲的蛋白質(zhì) 30 分鐘，并使用一抗進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡分析。