FIREFLYGLO螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒說明書

上海起發(fā)生物科技有限公司（Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.）屬于上海起發(fā)實驗試劑有限公司（2009年成立）旗下的子公司，成立的初衷是建立上海起發(fā)生物自有品牌，打造優(yōu)質(zhì)的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時，把好生物產(chǎn)業(yè)鏈中的國產(chǎn)生物試劑品質(zhì)關(guān)。未來讓每一個和我們一樣擁有民族情懷的企業(yè)，共同創(chuàng)世界優(yōu)秀的中國生物制造企業(yè)，圓夢中國。

產(chǎn)品詳情

產(chǎn)品描述

FIREFLYGLO   螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)是一種輝光型定量檢測試劑盒，具有高靈敏度和發(fā)光信號穩(wěn)定的特點，可以滿足高通量檢測螢光素酶在哺乳動物細(xì)胞中的表達(dá)。相對于云賀閃光型Firefly Luciferase Reporter Assay Kit ， 本品FIREFLYGLO Luciferase Reporter Assay Kit （YH0046）具有以下優(yōu)點：采用了一種全新的螢光素酶檢測底物，提高了發(fā)光信號的穩(wěn)定性，近乎2 小時的信號半衰期為實驗設(shè)計提供了更大的靈活性；采用加樣-混勻-檢測的操作方法，無需依賴自動進樣器，并且無需棄培養(yǎng)液、離心等步驟，簡化了實驗流程；本試劑盒組分做了大量優(yōu)化，與傳統(tǒng)閃光型產(chǎn)品相比，無明顯刺激性氣味。FIREFLYGLO 螢光素酶報告基因檢測試劑盒可用于多種常用細(xì)胞培養(yǎng)液：RPMI1640 、DMEM 、MEM- α、 F12 、DMEM/F12 等，其半衰期均為2 小時左右（22℃），滿足絕大多數(shù)高通量實驗需求。

注意事項

1 、檢測儀器選擇：能夠檢測化學(xué)發(fā)光的儀器都適用本試劑盒的檢測，但是針對相同的樣品，不同檢測器本底信號值和測量值均可能不同； 且對于同一樣本檢測，不同儀器的數(shù)值不可橫向比較。為防止孔間干擾， 推薦使用不透明白色細(xì)胞培養(yǎng)板。

2 、由于發(fā)光信號會受到檢測環(huán)境如培養(yǎng)基組分、溫度等影響，所以應(yīng)確保同組內(nèi)不同樣本檢測條件一致。

3 、酶促反應(yīng)對溫度較為敏感，加樣檢測前務(wù)必將檢測試劑以及細(xì)胞培養(yǎng)板平衡至室溫。

4 、為保證螢光素酶檢測試劑穩(wěn)定性， 適量分裝后建議-70℃長期避光保存或者短期存放于-20℃不超過一個月，并盡快使用，盡量避免多次反復(fù)凍融。

5、如需同時檢測多個細(xì)胞培養(yǎng)板，請盡量確保每個細(xì)胞板加入檢測溶液后孵育時間一致，再進行數(shù)據(jù)讀取，以此獲得最佳的檢測結(jié)果。

使用方法

使用方法

自備材料：

PBS；多道排槍；白色不透光細(xì)胞培養(yǎng)板；化學(xué)發(fā)光儀或酶標(biāo)儀。

檢測前準(zhǔn)備

1） 開始使用時將 FIREFLYGLO Luciferase Reaction Buffer 一次性全部倒入 FIREFLYGLO Luciferase Substrate 瓶中，充分混勻后，按使用需求進行分裝，建議-70℃長期保存或者短期存放于-20℃不超過一個月，并盡快使用。

2） 每次實驗前將分裝后凍存的檢測試劑平衡至室溫。

操作方法

1） 從細(xì)胞培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞培養(yǎng)板，放置 5-15min，恢復(fù)至室溫。注：使用白色不透光的細(xì)胞培養(yǎng)板，減少孔間的信號干擾。

2） 加入檢測溶液

使用多道排槍向每個細(xì)胞孔中加入平衡至室溫的含有底物的FIREFLYGLO Luciferase Reaction Buffer ， 加樣體積與細(xì)胞培養(yǎng)液體積相同。例如， 96 孔板通常加入 80-100ul 培養(yǎng)液，相應(yīng)加入 80ul-100ul 檢測溶液； 384 孔板通常加入 20-30ul 培養(yǎng)液，相應(yīng)加入 20-30ul 檢測溶液。

3） 振蕩混勻

為了使得細(xì)胞裂解充分，建議將細(xì)胞培養(yǎng)板放在振蕩混勻儀或附帶振板功能的儀器上，室溫條件下， 采用 中高速振板 5-10min。

注：建議振板混勻時間為 5-10min，可根據(jù)細(xì)胞量進行適當(dāng)調(diào)整，確保細(xì)胞充分裂解，得到穩(wěn)定的發(fā)光檢測結(jié)果。

4） 檢測

振板混勻后于化學(xué)發(fā)光儀或酶標(biāo)儀中檢測Firefly Luciferase 報告基因活性。注：為得到最佳檢測結(jié)果，請在加入檢測試劑后 2 小時內(nèi)完成檢測。