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技術(shù)文章

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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章AssayQuant:以熒光團(tuán)技術(shù),賦能高通量篩選與機(jī)制研究

AssayQuant:以熒光團(tuán)技術(shù),賦能高通量篩選與機(jī)制研究

更新時(shí)間:2025-04-16點(diǎn)擊次數(shù):1142

AssayQuant:以熒光團(tuán)技術(shù),賦能高通量篩選與機(jī)制研究

AssayQuant Technologies專注于開發(fā)激酶和磷酸酶的熒光檢測技術(shù),致力于為生物醫(yī)藥研發(fā)提供高效、精準(zhǔn)的解決方案。公司以PhosphoSens技術(shù)為核心,通過實(shí)時(shí)監(jiān)測酶活性反應(yīng)曲線,突破傳統(tǒng)終點(diǎn)法的局限性,幫助科研人員更深入地理解抑制劑作用機(jī)制。

AssayQuant的產(chǎn)品線覆蓋400余種激酶和磷酸酶檢測試劑盒,以及超30,000種熒光多肽底物,支持從基礎(chǔ)研究到藥物開發(fā)的全流程應(yīng)用。其技術(shù)已在全球范圍內(nèi)被132篇文獻(xiàn)引用,并與多家國際藥企及研究機(jī)構(gòu)建立合作。

作為中國市場的戰(zhàn)略布局,AssayQuant自2022年起授權(quán)上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司為全國一級(jí)代理商,提供本地化技術(shù)支持與服務(wù)。


核心優(yōu)勢

1.PhosphoSens技術(shù)

SOX熒光團(tuán):尺寸?。ㄅc色氨酸相當(dāng))、疏水性低,可直接標(biāo)記底物多肽,實(shí)現(xiàn)連續(xù)熒光信號(hào)輸出,避免化合物自身熒光干擾。

動(dòng)態(tài)監(jiān)測:每30秒至2分鐘采集數(shù)據(jù),實(shí)時(shí)捕捉酶活性變化,支持動(dòng)力學(xué)參數(shù)(如IC50、Ki、kon/koff)計(jì)算。

2.高特異性與生理相關(guān)性

底物基于天然激酶底物序列優(yōu)化,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果與體內(nèi)環(huán)境高度一致,生化實(shí)驗(yàn)與體內(nèi)研究相關(guān)性優(yōu)異。

3.多功能檢測模式

連續(xù)熒光檢測:兼容常規(guī)熒光酶標(biāo)儀,無需額外設(shè)備。

時(shí)間分辨熒光(TRF):使用Eu3?替代Mg2?,通過紅移信號(hào)(620nm)消除背景干擾,適用于高靈敏度終點(diǎn)檢測。

4.靈活應(yīng)用場景

支持抑制劑效能評估、激酶組分析、高通量篩選(HTS)、脫靶效應(yīng)研究等,覆蓋腫瘤、免疫、代謝疾病等領(lǐng)域。


主要產(chǎn)品、技術(shù)介紹:

1.ALK [C1156Y](PhosphoSens Substrate: AQT0101)

AssayQuant:以熒光團(tuán)技術(shù),賦能高通量篩選與機(jī)制研究

AssayQuant 的 PhosphoSens 連續(xù)檢測技術(shù) 采用簡單的 “添加-讀取"操作流程,支持實(shí)時(shí)動(dòng)力學(xué)監(jiān)測,僅需通過熒光強(qiáng)度(FI)測量即可完成。

該技術(shù)通過測量反應(yīng)初始階段(通常為前30-60分鐘)的初始線性區(qū)域斜率,提供高精度和高準(zhǔn)確性的 初始反應(yīng)速率 數(shù)據(jù),并以每30秒至2分鐘的頻率采集大量數(shù)據(jù)點(diǎn)。

連續(xù)檢測格式 還可通過以下方式校正化合物自熒光干擾:

背景信號(hào)(包含化合物及反應(yīng)體系中除酶外的所有組分)的熒光信號(hào)在反應(yīng)過程中恒定不變;

通過從總熒光信號(hào)(包含酶及所有反應(yīng)組分)中減去背景信號(hào),即可計(jì)算每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的 凈信號(hào)。

該技術(shù)兼容幾乎所有具備 動(dòng)力學(xué)讀板功能 的商用熒光酶標(biāo)儀及實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化設(shè)備,無需終止反應(yīng)或顯色步驟,顯著縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間并提升通量。


2.ABL1(PhosphoSens Substrate: AQT0030)

AssayQuant:以熒光團(tuán)技術(shù),賦能高通量篩選與機(jī)制研究

由于許多化合物庫含有自熒光化合物,AssayQuant 推出了 PhosphoSens Red 檢測試劑盒,該試劑盒允許在更長波長(>600 nm)下進(jìn)行檢測,同時(shí)保持相同的激發(fā)波長最大值,并采用 時(shí)間分辨熒光(TRF) 技術(shù)。

我們建議在激發(fā)光與發(fā)射波長檢測之間設(shè)置 100 微秒延遲,并采用 300 微秒采集時(shí)間,以避免反應(yīng)混合物中熒光材料(具有納秒級(jí)短壽命)的信號(hào)干擾。

反應(yīng)完成后,向每個(gè)孔中加入基于 銪離子(Eu3+) 的試劑,該試劑會(huì)置換螯合復(fù)合物中的 Mg2+。Soc 熒光團(tuán)被激發(fā)后,通過敏化作用增強(qiáng)銪的發(fā)光,產(chǎn)生最大波長為 615 nm(紅色) 的光信號(hào),可通過標(biāo)準(zhǔn)濾光片進(jìn)行測量。


3.CDC42BPG(PhosphoSens Substrate: AQT0837)


AssayQuant:以熒光團(tuán)技術(shù),賦能高通量篩選與機(jī)制研究

由于許多化合物庫含有自熒光化合物,AssayQuant開發(fā)了PhosphoSens Red檢測技術(shù),該技術(shù)允許在更長波長(>600 nm)下進(jìn)行檢測,同時(shí)保持相同的激發(fā)波長最大值,并采用時(shí)間分辨熒光(TRF)技術(shù)。

我們建議在激發(fā)光與發(fā)射波長檢測之間設(shè)置100微秒延遲,并采用300微秒采集時(shí)間,以避免反應(yīng)混合物中熒光材料(具有納秒級(jí)短壽命)的信號(hào)污染。

反應(yīng)完成后,向每個(gè)孔中加入基于銪離子(Eu3?)的試劑,該試劑會(huì)置換螯合復(fù)合物中的鎂離子(Mg2?)。Sox熒光團(tuán)的激發(fā)會(huì)敏化銪離子的發(fā)光,產(chǎn)生最大波長為615 nm(紅色)的光信號(hào),可通過標(biāo)準(zhǔn)濾光片進(jìn)行測量。


目標(biāo)客戶群體

生物醫(yī)藥企業(yè):小分子激酶抑制劑研發(fā)、臨床前藥效評價(jià)。

科研機(jī)構(gòu):癌癥、免疫疾病等領(lǐng)域的酶學(xué)機(jī)制研究。

CRO/CDMO:高通量篩選、化合物庫活性評估。

診斷試劑開發(fā):基于激酶活性的檢測方法學(xué)建立。


常見問題與解答

Q1:PhosphoSens技術(shù)與傳統(tǒng)終點(diǎn)法相比有何優(yōu)勢?

A:傳統(tǒng)終點(diǎn)法僅能獲取單一時(shí)間點(diǎn)數(shù)據(jù),而PhosphoSens通過連續(xù)監(jiān)測反應(yīng)曲線,可精準(zhǔn)計(jì)算動(dòng)力學(xué)參數(shù)(如IC50、Ki),并區(qū)分可逆/不可逆抑制劑。

Q2:SOX熒光團(tuán)是否兼容常規(guī)熒光酶標(biāo)儀?

A:是的。SOX在485nm激發(fā)/485nm發(fā)射模式下,與主流酶標(biāo)儀(如FlexStation 3、SpectraMax)兼容。

Q3:如何解決化合物自身熒光干擾問題?

A:使用PhosphoSens-Red試劑盒(含Eu3?),通過時(shí)間分辨熒光(延遲100秒讀取620nm信號(hào))有效規(guī)避干擾。

Q4:是否支持高通量篩選(HTS)?

A:支持。PhosphoSens試劑盒設(shè)計(jì)適配96孔板,可集成至自動(dòng)化液體處理系統(tǒng),單板通量達(dá)384孔。

Q5:能否定制特殊突變體底物?

A:可以。AssayQuant提供定制化多肽合成服務(wù),覆蓋野生型及常見突變體(如EGFR T790M、ALK C1156Y)。

Q6:樣品處理對檢測結(jié)果影響大嗎?

A:建議使用低濃度ATP(1-2 mM)模擬生理?xiàng)l件,并避免反復(fù)凍融。具體方案可參考產(chǎn)品說明書或聯(lián)系技術(shù)支持。

Q7:試劑盒的有效期和儲(chǔ)存條件?

A:多數(shù)試劑盒有效期為12個(gè)月,需避光儲(chǔ)存于-20℃。凍干粉需復(fù)溶后48小時(shí)內(nèi)使用。

Q8:如何驗(yàn)證抑制劑的可逆性?

A:采用“跳躍稀釋法":在高濃度抑制劑(>IC50 25倍)中孵育酶后稀釋,可逆抑制劑活性恢復(fù),不可逆抑制劑活性維持低位。

Q9:是否提供技術(shù)培訓(xùn)與文獻(xiàn)支持?

A:是的。AssayQuant提供線上/線下操作培訓(xùn),并可分享同類靶點(diǎn)的成功案例及文獻(xiàn)數(shù)據(jù)。

Q10:支持哪些物種的激酶檢測?

A:目前主要覆蓋人類激酶組,部分試劑盒兼容小鼠、大鼠等模式生物,定制服務(wù)可擴(kuò)展至其他物種。


熱銷產(chǎn)品

貨號(hào)

品名

規(guī)格

品牌

CSKS-AQT0449B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

AQT1000XDTT-1x0.5mL

1M DTT Solution 1 x 0.5 mL

ea

AssayQuant

AQT1000XEGTA

550 mM EGTA solution, 1 x 0.5 mL

ea

AssayQuant

AQT100XATP

100mM ATP (100X), 1 x 0.5 mL

ea

AssayQuant

AQT10XKRB

Reaction Buffer (RB), 10X, No DTTor EGTA

1.5 mL

AssayQuant

AQT10XKRB-1x20mL

10X Kinase Reaction Buffer - No DTT, No EGTA, 1 x 20 mL

ea

AssayQuant

AQT1XKDB

Enzyme Dilution Buffer (EDB), 1X, No DTT or EGTA

1.5 mL

AssayQuant

AQT1XKDB-1x20mL

1X Kinase Dilution Buffer, No DTT, No EGTA, 1 x 20 mL

ea

AssayQuant

CSKS-AQT0001

PhosphoSensKit

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0032B

BULK - Cysteine Sox Kinase Sensor AQT0032, 1 mg net peptide, lyophilized

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0101

PhosphoSens Kit

1mg

AssayQuant

CSKSAQT0101B

BULK - Cysteine Sox Kinase Sensor AQT0101, Peptide Substrate, 1mg net peptide, lyophilized (Lot 011-02V1)

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0101B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0101B- 1 x 1 mg net peptide, lyophilized.

BULK - Cysteine Sox Kinase Sensor AQT0101, 1 x 1 mg net peptide, lyophilized.

ea

AssayQuant

CSKS-AQT0101K

Cysteine Sox Kinase Sensor AqT0101

96 assays

AssayQuant

CSKS-AQT0104B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0157B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0186B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0231

Ser/Thr Kinase Peptide substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0231B

PhosphoSens substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0231k

Ser/Thr Kinase Assay KIT PRKACG (PKACG, PKACg); ROCK1; ROCK2; RPS6KB1 (p70S6K); RPS6KB2(P70S6KB)

96t

AssayQuant

CSKS-AQT0235B

DDR2 peptide

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0255B

BULK Cysteine Sox Kinase Sensor, AQT0255, Peptide substrate, 1mg net lyophilized

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0258

PhosphoSensKit

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0258B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0280B

DDR1 peptide

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0296B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0297

PhosphoSensKit

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0297B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0414

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0426

Ser/Thr Kinase Peptide substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0459B

BULK Cysteine Sox Kinase Sensor, AQT0459 , Peptide substrate, 1mg net lyophilized

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0490B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0505B

Peptide substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0505K

KIT-Cysteine Sox Kinase Sensor

96T

AssayQuant

CSKS-AQT0515

Cysteine Sox Kinase Sensor

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0535

Ser/Thr Kinase Peptide substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0536B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0537B

PhosphoSens substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0653B

Bulk Sensor Peptide (PN:CSKS-AQT0653B)

1 mg

AssayQuant

CSKS-AQT0653KR

Red-Shift Evaluation Kits (PN:CSKS-AQT0653KR)

Kits

AssayQuant

CSKS-AQT0663B

Cysteine Sox Kinase Sensor AQT0663, 1 x 1 mg net peptide, lyophilized.

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0663K

KIT - Cysteine Sox Kinase Sensor, AQT0663, 96 assays, liquid

kit

AssayQuant

CSKS-AQT0688B

Peptide substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0691B

Peptide substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0693B

PhosphoSens Kinase Sensor Peptide

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0730

Ser/Thr Kinase Peptide substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0732B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0733B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0734

BULK Cysteine Sox Kinase Sensor, AQT0734 , Peptide substrate, 1mg net lyophilized

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0742

Ser/Thr Kinase Peptide substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0759B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0766B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0803

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0839B

PhosphoSens substrate

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0887B

BULK - Cysteine Sox Kinase Sensor, AQT0887, 1 mg net peptide, lyophilized

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT0991B

Cysteine Sox Kinase Sensor AQT0991, peptide substrate, 1mg net peptide, lyophilized

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT1030B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

CSKS-AQT50

50mM(50*)Europium

15ml

AssayQuant

CSPS-AQT0737B

PEPTIDE SUBSTRATE

1mg

AssayQuant

Sample

Ammonium bicarb solution for peptide solubilization

1.0 mL

AssayQuant

如對該品牌產(chǎn)品感興趣,歡迎咨詢授權(quán)代理商:上海起發(fā)!


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