? 公司介紹

PolyLC Inc.是一家專(zhuān)注生物色譜材料與方法的科技公司，主要業(yè)務(wù)圍繞蛋白質(zhì)、肽段及其他生物分子的液相色譜分離展開(kāi)。公司提供區(qū)別于傳統(tǒng)反相色譜的多種分離模式，產(chǎn)品矩陣涵蓋離子交換色譜柱、親水作用色譜柱、疏水作用色譜柱、體積排阻色譜柱、固相萃取柱以及便攜式液相色譜儀。

在產(chǎn)品應(yīng)用層面，PolyLC Inc.的解決方案覆蓋血紅蛋白變異體分析、蛋白質(zhì)變體分析、單克隆抗體分析、組蛋白修飾分析、肽圖分析、磷酸肽富集、寡核苷酸分析、蛋白質(zhì)純化、肽段分離等多個(gè)方向。憑借在親水作用色譜等領(lǐng)域積累的技術(shù)經(jīng)驗(yàn)，以及嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系，PolyLC Inc.為科研人員和工業(yè)用戶提供可重復(fù)、可定制的色譜產(chǎn)品與技術(shù)支持。

? 核心優(yōu)勢(shì)

▎豐富的分離模式選擇

PolyLC Inc.提供弱陽(yáng)離子交換、強(qiáng)陽(yáng)離子交換、弱陰離子交換、親水作用、疏水作用、體積排阻等多種分離機(jī)制，用戶可根據(jù)樣品的電荷屬性、極性、疏水性及分子尺寸靈活選用，形成多維分離策略。

▎針對(duì)生物分子的專(zhuān)業(yè)設(shè)計(jì)

色譜填料以多肽涂層硅膠為基礎(chǔ)，能夠在分離過(guò)程中較好地保持蛋白質(zhì)的構(gòu)象與生物活性，適用于對(duì)結(jié)構(gòu)完整性有要求的蛋白質(zhì)及多肽分析。

▎嚴(yán)格的質(zhì)量控制

產(chǎn)品生產(chǎn)遵循規(guī)范的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，批間差異較小，有助于用戶在長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)中獲得一致的分離表現(xiàn)。

▎定制化與技術(shù)支持能力

PolyLC Inc.可針對(duì)不同研究項(xiàng)目的分離需求提供個(gè)性化支持與定制方案，協(xié)助用戶設(shè)計(jì)適配的色譜分離流程。

▎應(yīng)用場(chǎng)景廣泛

從基礎(chǔ)科研中的蛋白質(zhì)變體分析，到臨床相關(guān)的血紅蛋白變異體檢測(cè)，再到工業(yè)領(lǐng)域的單克隆抗體與寡核苷酸質(zhì)量分析，PolyLC Inc.的產(chǎn)品均有成熟應(yīng)用案例。

? 熱門(mén)產(chǎn)品介紹

?-1　PolyCAT A™ 弱陽(yáng)離子交換色譜柱

◇ 產(chǎn)品特點(diǎn)

PolyCAT A™是一種高性能弱陽(yáng)離子交換材料，能夠?qū)?fù)雜蛋白質(zhì)與肽段混合物提供良好的分辨率。其對(duì)單一殘基差異的蛋白質(zhì)即可實(shí)現(xiàn)分離，峰形尖銳、拖尾小、結(jié)合容量高。

◇ 存儲(chǔ)條件

﹒若一至兩日內(nèi)繼續(xù)使用：如起始流動(dòng)相鹽濃度不超過(guò) 20 mM，可將色譜柱留存于起始流動(dòng)相中，兩端封堵即可；若鹽濃度超過(guò) 20 mM，建議先用純水沖洗后再保存。

﹒若數(shù)日至兩周內(nèi)使用：應(yīng)用純水沖洗色譜柱。

﹒若超過(guò)兩周不使用：依次用純水、乙腈-水混合溶液（比例可在 50:50 至 80:20 之間）沖洗，兩端封堵后置于冷藏環(huán)境中保存；再次使用時(shí)需按新柱條件重新平衡。

◇ 工作原理

PolyCAT A™通過(guò)固定相表面的弱陽(yáng)離子交換基團(tuán)與帶電蛋白質(zhì)分子發(fā)生靜電相互作用。在流動(dòng)相中鹽濃度升高的梯度下，蛋白質(zhì)依電荷差異依次洗脫，從而實(shí)現(xiàn)復(fù)雜蛋白質(zhì)混合物的分離。

◇ 使用方法

﹒根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)與電荷特征，選用合適的緩沖體系。

﹒以低濃度鹽緩沖液平衡色譜柱。

﹒進(jìn)樣后，通過(guò)提高流動(dòng)相鹽濃度執(zhí)行梯度洗脫。

﹒該方法常用于蛋白質(zhì)變體分析、血紅蛋白分離、單克隆抗體分析、組蛋白修飾分析以及 PEG 化蛋白質(zhì)的位置異構(gòu)體分離。

?-2　PolySULFOETHYL A™ 強(qiáng)陽(yáng)離子交換色譜柱

◇ 產(chǎn)品特點(diǎn)

PolySULFOETHYL A™是一種專(zhuān)為肽段 HPLC 設(shè)計(jì)的強(qiáng)陽(yáng)離子交換材料。其親水性特點(diǎn)可減弱疏水相互作用，帶來(lái)較高的回收率并減少峰拖尾，適用于復(fù)雜酶解肽段的多維分離。

◇ 存儲(chǔ)條件

﹒短期保存可參照 PolyCAT A™的存儲(chǔ)原則，根據(jù)停用時(shí)長(zhǎng)選擇純水沖洗或純水加有機(jī)溶劑沖洗后冷藏保存。

﹒流動(dòng)相中避免使用TFA或七氟丁酸（HFBA），以免影響肽段的保留行為。

◇ 工作原理

該色譜柱依靠強(qiáng)陽(yáng)離子交換基團(tuán)，按肽段的電荷-質(zhì)量比差異進(jìn)行分離。肽段在酸性條件下帶正電，與固定相結(jié)合；隨著流動(dòng)相鹽濃度升高，肽段依電荷強(qiáng)弱依次洗脫，實(shí)現(xiàn)復(fù)雜肽段混合物的分級(jí)。

◇ 使用方法

﹒適用流動(dòng)相添加劑包括 5-10 mM 磷酸氫二鉀、0.1% 甲酸或 0.1% 乙酸，避免使用 TFA 或 HFBA。

﹒樣品鹽濃度建議控制在 30 mM 以下，必要時(shí)通過(guò)稀釋或透析處理。

﹒胰蛋白酶消化后需將 pH 調(diào)整至 2.7-3.0 區(qū)間再上樣。

﹒該色譜柱常用于蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物的多維液相分離、磷酸肽選擇性富集、二硫鍵連接肽段分離、C 末端片段分離以及肽圖分析。

?-3　PolyWAX LP™ 弱陰離子交換色譜柱

◇ 產(chǎn)品特點(diǎn)

PolyWAX LP™是一種親水性弱陰離子交換材料，適用范圍廣，可分離蛋白質(zhì)、肽段、核酸等多種生物分子，在等度分離酸性氨基酸、肽段、蛋白質(zhì)以及核酸方面表現(xiàn)穩(wěn)定。

◇ 存儲(chǔ)條件

﹒保存方式與其他離子交換色譜柱一致，依據(jù)停用時(shí)長(zhǎng)選擇純水沖洗或純水加有機(jī)溶劑沖洗后冷藏保存，兩端封堵。

﹒存儲(chǔ)與操作過(guò)程中注意流動(dòng)相組成，避免引入影響分離效果的強(qiáng)酸根或有機(jī)改性劑。

◇ 工作原理

PolyWAX LP™通過(guò)固定相表面的弱陰離子交換基團(tuán)與帶負(fù)電的生物分子發(fā)生靜電相互作用。在鹽濃度梯度下，生物分子依電荷差異依次洗脫，實(shí)現(xiàn)混合物分離。

◇ 使用方法

﹒根據(jù)目標(biāo)分子的電荷屬性與等電點(diǎn)，選擇合適的緩沖液與 pH 條件。

﹒以低鹽緩沖液平衡色譜柱后進(jìn)樣。

﹒通過(guò)鹽濃度梯度實(shí)現(xiàn)洗脫分離。

﹒該色譜柱常用于酸性氨基酸、肽段與蛋白質(zhì)的等度分離，酸性蛋白質(zhì)與多肽的純化，磷酸肽的選擇性分離，寡核苷酸及其類(lèi)似物的分析與純化，以及蛋白質(zhì)酶解前的混合床離子交換預(yù)分級(jí)。

? 解決實(shí)驗(yàn)中的各類(lèi)問(wèn)題

▎傳統(tǒng)反相色譜難以分離的復(fù)雜生物分子

許多蛋白質(zhì)因含有大量疏水殘基，在傳統(tǒng)反相色譜中不易洗脫，峰形展寬嚴(yán)重。PolyLC Inc.的離子交換與親水作用色譜柱提供了有效的替代方案。

▎蛋白質(zhì)分離過(guò)程中生物活性易丟失

疏水作用色譜柱采用全水相緩沖液，能夠在分離的同時(shí)較好地保留蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)與生物活性，適用于對(duì)活性有要求的樣品。

▎血紅蛋白變異體檢測(cè)的分辨率不足

專(zhuān)用陽(yáng)離子交換色譜柱可對(duì)血紅蛋白變異體進(jìn)行準(zhǔn)確分離與定量，為相關(guān)疾病研究提供支持。

▎復(fù)雜肽段混合物的鑒定困難

強(qiáng)陽(yáng)離子交換色譜柱可與反相色譜聯(lián)用，構(gòu)成 SCX-RPC 二維分離策略，顯著提升復(fù)雜酶解肽段中肽段的鑒定數(shù)量。

▎磷酸肽等特定肽類(lèi)的選擇性富集

弱陰離子交換與強(qiáng)陽(yáng)離子交換色譜柱均可用于磷酸肽的選擇性富集與分離，為翻譯后修飾研究提供便利。

▎寡核苷酸與核酸樣品的純度分析

弱陰離子交換色譜柱適用于寡核苷酸及其類(lèi)似物的分析與純化，也可用于 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物的分離。

▎現(xiàn)場(chǎng)或移動(dòng)場(chǎng)景下的液相分析需求

便攜式液相色譜系統(tǒng)體積小、重量輕，可在現(xiàn)場(chǎng)開(kāi)展實(shí)驗(yàn)室級(jí)別的液相分析，適用于血紅蛋白等項(xiàng)目的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。

▎復(fù)雜碳水化合物的分離

專(zhuān)用 HILIC 色譜柱對(duì)復(fù)雜碳水化合物具有較高的保留容量，常僅需乙腈與水即可操作，便于與質(zhì)譜聯(lián)用。

? 購(gòu)買(mǎi)產(chǎn)品常見(jiàn)疑問(wèn)與解答

Ｑ1：為什么不能直接用反相色譜分析蛋白質(zhì)？

Ａ：蛋白質(zhì)含有大量疏水殘基，在許多情況下難以從反相固定相上洗脫，即便洗脫也可能出現(xiàn)峰形展寬。離子交換、親水作用等替代模式更適合此類(lèi)樣品。

Ｑ2：流動(dòng)相需要脫氣嗎？

Ａ：僅在水中執(zhí)行有機(jī)溶劑梯度時(shí)才需要脫氣。離子交換或疏水作用色譜模式下通常無(wú)需脫氣。

Ｑ3：色譜柱應(yīng)如何正確保存？

Ａ：若一至兩日內(nèi)使用，鹽濃度低于 20 mM 時(shí)可存于起始流動(dòng)相中封堵保存，否則先以水沖洗；數(shù)日至兩周內(nèi)使用，應(yīng)用純水沖洗；超過(guò)兩周不使用，則用水、再用乙腈-水混合液沖洗后冷藏保存，再次使用前重新平衡。

Ｑ4：含有機(jī)溶劑的流動(dòng)相如何正確配制？

Ａ：先調(diào)節(jié)水相鹽溶液的 pH 并過(guò)濾，再將水相轉(zhuǎn)入容量瓶，加入有機(jī)溶劑至接近刻度線，倒置 8-9 次混勻并至室溫，最后定容混勻。乙腈與水混合吸熱，可適當(dāng)溫水浴加速回溫并兼作脫氣。

Ｑ5：肽段在強(qiáng)陽(yáng)離子交換色譜柱上無(wú)保留，可能是什么原因？

Ａ：常見(jiàn)原因包括樣品溶劑或起始流動(dòng)相含 TFA/HFBA、鹽濃度超過(guò) 30 mM、酶解后 pH 未調(diào)至 2.7-3.0、iTRAQ 衍生化后 pH 與脫鹽處理不當(dāng)，或上樣量超過(guò)推薦最大載量的 6 倍。

Ｑ6：能否在流動(dòng)相中使用 TFA 或 HFBA？

Ａ：PolyLC 的色譜材料通常不建議使用 TFA 或 HFBA，因其會(huì)干擾分離效果。

Ｑ7：HILIC 模式下峰形嚴(yán)重拖尾或分裂，如何處理？

Ａ：可能原因包括樣品中有機(jī)溶劑比例低于流動(dòng)相、溶質(zhì)電荷-質(zhì)量比高而反離子不匹配、或溶質(zhì)電荷-質(zhì)量比過(guò)高需要提高鹽濃度?？上鄳?yīng)調(diào)整樣品溶劑組成或提高流動(dòng)相鹽濃度。

Ｑ8：如何選擇合適的疏水作用色譜柱？

Ａ：PolyLC 提供三種不同疏水強(qiáng)度的 HILIC 色譜柱，相對(duì)疏水值分別為 100、60 和 15。除非目標(biāo)蛋白明顯疏水，一般建議選用疏水值居中的型號(hào)。

Ｑ9：上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司可提供哪些服務(wù)？

Ａ：作為 PolyLC Inc.的特約代理經(jīng)銷(xiāo)商，上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司提供 PolyLC 品牌產(chǎn)品的咨詢、選型建議、報(bào)價(jià)與供貨服務(wù)，并協(xié)助用戶對(duì)接技術(shù)資料。

Ｑ10：訂貨周期與售后支持如何保障？

Ａ：可通過(guò)上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司提交采購(gòu)需求，由專(zhuān)人跟進(jìn)訂單狀態(tài)；產(chǎn)品使用過(guò)程中如遇色譜條件優(yōu)化、柱效評(píng)估等技術(shù)問(wèn)題，亦可向上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司尋求協(xié)助，由其協(xié)調(diào)品牌方資源提供支持。

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