swant 6B3說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品：小鼠抗鈣視網(wǎng)膜蛋白抗體（單克隆）

代碼：6B3

批號(hào)：010399

形式：凍干濃縮上清液（不含防腐劑）。

數(shù)量：500µl。

復(fù)溶：用500µl雙蒸餾水。

描述：

用重組人calretinin-22k免疫小鼠產(chǎn)生抗calretinin的抗體6B3[1，2]。鈣視網(wǎng)膜蛋白22k是鈣視網(wǎng)膜蛋白基因的選擇性剪接產(chǎn)物(3)，與鈣視網(wǎng)膜蛋白相同，可達(dá)Arg178。融合后以人重組鈣視網(wǎng)膜蛋白為靶標(biāo)篩選雜交瘤細(xì)胞，篩選克隆6B3?？贵w6B3識(shí)別鈣視網(wǎng)膜蛋白和鈣視網(wǎng)膜蛋白-22k共有的前4個(gè)EF手結(jié)構(gòu)域內(nèi)的表位(2)。評(píng)價(jià)其特異性和效價(jià)：a）通過(guò)生物素-抗生物素蛋白標(biāo)記4%多聚甲醛（或10%福爾馬林緩沖液）固定的冷凍、振動(dòng)和石蠟切片，b）通過(guò)免疫印跡的免疫酶標(biāo)記，c）通過(guò)組織鈣視網(wǎng)膜蛋白基因敲除小鼠的免疫組織化學(xué)(6)

該產(chǎn)品是針對(duì)鈣結(jié)合蛋白D-28k和鈣調(diào)蛋白相關(guān)的EF手家族鈣結(jié)合蛋白calretinin(4)的單克隆抗體。該抗體與不同種屬組織中的鈣視網(wǎng)膜蛋白發(fā)生特異性反應(yīng)（見(jiàn)免疫印跡）。該抗體不與鈣結(jié)合蛋白D-28k或其他已知的鈣結(jié)合蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)，通過(guò)其在腦中的分布以及免疫印跡測(cè)定。Calretinin是一種有吸引力的神經(jīng)解剖學(xué)工具，這種McAB保證了抗Calretinin抗體持續(xù)產(chǎn)生具有相同特異性和化學(xué)同一性的恒定滴度。該抗體可識(shí)別人間皮瘤中的鈣視網(wǎng)膜蛋白(4,5)。

儲(chǔ)存條件：

復(fù)溶后，以小份（例如1µl）冷凍并保持在-80 ℃（或至少-20 ℃）。連續(xù)使用時(shí)，保持在4 ℃（含0.01%疊氮化納）。避免反復(fù)凍融。

腦提取物的免疫印跡

抗體6B3可特異性染色腦提取物免疫印跡上的鈣視網(wǎng)膜蛋白條帶（圖1）。

1 2 3 4 5 6 7

鈣視網(wǎng)膜蛋白基因敲除小鼠的免疫組織化學(xué)

抗體6B3免疫標(biāo)記正常大腦中的神經(jīng)元亞群，具有高效率（圖2a），但不染色鈣視網(wǎng)膜蛋白基因敲除小鼠的大腦（圖2b）。

工作稀釋液：

免疫組織化學(xué)：當(dāng)在冷凍切片機(jī)或多聚甲醛(4%)或福爾馬林固定組織的石蠟切片上進(jìn)行時(shí)，為1:2'000-1:5'000。

免疫印跡：1:1'000-1:2'000。

對(duì)于免疫組織化學(xué)和免疫印跡，采用抗生物素蛋白-生物素法測(cè)定滴度。我們建議通過(guò)滴定實(shí)驗(yàn)確定宜稀釋度

參考文獻(xiàn)

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